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微孔板读数仪

我们拥有完善而可靠的微孔板读数仪系列产品,具有高灵活、高灵敏、动力学范围宽泛和高通量的优点,解决您在复杂分析实验中遇到的挑战。每个实验室都是独一无二的,这就是为什么您需要选择符合自己需要的微孔板读数仪的原因。或许您的研究需要最大的应用灵活性,或者是高通量。也许您正在寻找一款简单,但是结果可靠的仪器。无论您需要什么,伯托公司总有一款仪器满足您的需求。

微孔板读数仪应用兼容性表格.

微孔板读数仪的种类

微孔板读数仪有多种分类方法,但是在选择或者购买的时候,有两种重要的分类方法:一种是检测技术,另一种是波长选择机制。

 

检测技术分类的微孔板读数仪

采用检测技术分类的微孔板读数仪主要有两种:专用微孔板读数仪,另一种是多模式微孔板读数仪。

专用微孔板读数仪

专用微孔板读数仪只能测量一种技术: 光吸收, 发光或者荧光。 它们缺乏多模式微孔板读数仪的灵活性,但是它们通常拥有更好的灵敏度和可靠性,而且通常更便宜。例如, Centro XS3 LB960发光微孔板读数仪 在发光检测中具有最高的灵敏度,即使是最高灵敏度的多模式微孔板读数仪也无法比拟。

 

多模式微孔板读数仪

多模式微孔板读数仪 能够使用多种检测技术,它们比专用微孔板读数仪更加复杂,需要做一些设计的妥协,以便在一个仪器中实现所有检测技术,但是,它们具有更大的灵活性,尤其是在一个高级仪器中整合每一种检测技术的光路系统,如 Mithras² LB943多模式微孔板读数仪 在绝大多数应用中均有优秀的性能。

传统上,多模式微孔板读数仪价格昂贵,但是一些仪器基于模块化设计,用户可以仅仅配置自己真正需要的模块。Tristar²Tristar² S 是这类仪器的优秀代表。

有关检测技术的更多信息,请参见下面。

检测波长分类的微孔板读数仪

在选择微孔板读数仪时,另一个重要特征是选择波长,因为它是许多应用的需求。它主要的选择是滤光片、光栅和无波长选择。

滤光片

经济型微孔板读数仪通常选择特定波长的滤光片作为任何已定检测方法的配置。经济型选项并不意味着性能低端:滤光片具有很高的透光率,在很多应用中,这带来了更高的灵敏度。而且,波长的切换非常快,这在比列测定分析中是非常理想的。它的主要缺点是:每一个波长需要不同的滤光片,这降低了灵活性,也不能进行波长扫描。

光栅

另一方面,光栅提供了完全的灵活性,不仅是在波长选择方面,也在带宽选择方面。但是,正如前面提到的,在大多数应用中,灵敏度会比采用滤光片要更差一些。

伯托公司的一些微孔板读数仪提供了两方面的最优方案:Tristar² S LB 942Mithras² LB 943可以 同时 选择滤光片和光栅两种配置,这样,您可以为您的应用选择最优的方案。

无波长选择

发光计数仪通常是没有滤光片和其他任何波长选择的方法:所有波长的光都有可能到达光电倍增管。这提供了最高的灵敏度,但是,无法做BRET检测, 因为这个应用需要选择性的测量供体和受体发出的光。

检测技术

伯托公司为多种检测技术提供多模式和专用微孔板读数仪,检测模式包括:

  • 荧光
  • 吸收光
  • 发光
  • 时间分辨荧光(TRF)
  • HTRF®
  • 荧光偏振(FP)
  • BRET
  • AlphaScreen®

 

可提供基于滤光片和光栅的微孔板读数仪。更多有个那检测模式的资料如下:

紫外/可见光吸收或者光密度用于无数的经典比色法、ELISA、核酸和蛋白质定量等。用Lambert-Beer法则描述了光吸收测定的基本原理。

荧光 是一种物质吸收光或者电磁辐射发出的光。和光吸收方法相比,荧光方法具有更好的灵敏度、特异性和动态范围。荧光方法也包含FRET和荧光偏振(FP)等方法(见下文)。荧光方法经常使用多模式微孔板读数仪进行测量。

发光 是化学或者生化反应的结果。因此,不需要激发能量。发光最常用的应用是报告基因、ATP测量和化学发光免疫分析(CLIA)。其他发光应用还有半胱天冬酶(caspase)或者蛋白激酶和活性氧(ROS)。发光通常用微孔板发光仪或者管式发光仪测量。

BRET(生物荧光共振能量转移)的原理是:如果荧光蛋白和荧光素酶非常接近,荧光素酶反应产生的能量可以用来激发荧光蛋白,由此,它可以作为监测大分子相互作用的工具。由于许多专用发光仪缺少滤光片,多模式微孔板读数仪通常是BRET测量的首选。

FRET(荧光共振能量转移)是一种双染料荧光检测分析方法。它需要一个供体和一个距离非常接近(10-100A)的受体。在激发能量的作用下,供体荧光染料的能量转移给受体荧光染料(如YFP)后,受体荧光染料在无需直接激发的情况下发光。FRET是最常用来测定蛋白和核酸之间分子间相互作用的方法。

荧光偏振 (FP) 是测量小分子与大分子结合的理想方法。它是基于一个被偏振光激发的荧光基团。蛋白质和其他大分子由于其大小在溶液中旋转很慢,被偏振光激发的时候会发射偏振光。因此,高水平的极化预示存在较大的分子。

AlphaScreen® 依赖于水凝胶涂层的供体和受体珠子提供结合生物大分子的官能团。当用680nm波长的激光激发供体珠子时,供体珠子产生单线态氧,单线态氧将能量转移给供体,发射波长从520nm到620nm之间的光。产生的光的数量与结合的供体-受体珠子数量成正比。AlphaScreen®是一种评估结合物(或结合物聚合体)和目标物(或目标物聚合体)间相互作用的通用方法。只有配置了激光的微孔板读数仪采用用于AlphaScreen®的测量。

时间分辨荧光 (TRF) 是指采用独特荧光寿命的荧光基团来避免荧光寿命相差非常大的分子或者气体因素(最重要是激发光)引起的干扰。它采用长发射荧光基团(镧系),如铕或铽。TRF用于阐明分子相互作用,分子间或者分子内距离,微环境的变化,分子混合物的分辨率等等。闪光灯或者激光是用于TRF测量的微孔板读数仪的首选光源。

时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET) 是以长发射荧光基团(镧系)作为供体的FRET的变体。TR-FRET是药物开发研究人员的强有力工具。除了更高的通量和更少的假阳性/假阴性结果,TR-FRET提供了更高的灵活性、可靠性和灵敏度。TR-FRET能用于检测两个分子之间的关系,如分析受体-配体或者蛋白-蛋白之间的相互作用。